Вопросы вирусологии. 2022; 67: 77-86
Выделение нового штамма М-2020 вируса оспы верблюдов (Poxviridae: Orthopoxvirus: Camelpox virus) в Республике Казахстан и изучение его репродукции на различных биологических системах
https://doi.org/10.36233/0507-4088-100Аннотация
Введение. В данной работе представлены результаты выделения вируса оспы верблюдов (ОВ) (Poxviridae: Orthopoxvirus: Camelpox virus, CMLPV) и изучения его репродуктивных свойств на чувствительных биологических системах.
Материал и методы. В исследовании использован эпизоотический штамм М-96 вируса, а также его аттенуированные варианты КМ-40 и КМ-70, полученные путём последовательного пассирования. Выделение возбудителя из суспензии биопсийных образцов осуществляли на культуре клеток и в развивающихся куриных эмбрионах (РКЭ). Все эксперименты проводили с числом повторности, обеспечивающим получение достоверных результатов.
Результаты. В серии экспериментов выделен вирус ОВ из корочек и соскобов с оспенными папулами кожи, полученных во время вспышки заболевания от больных верблюдов (Camelus bactrianus) из различных районов Мангистауской области Республики Казахстан в конце 2019 г. При этом признаки размножения возбудителя на хорион-аллантоисной оболочке (ХАО) отмечались с 3 пассажа. Полученный вирус вызывал формирование на ХАО патологических изменений в виде возвышающихся точечных или сплошных узелков белого цвета, ограниченных от окружающей ткани, с геморрагическими очагами в центре, в размере от 1,0 до 5,0 мм. Определены репродуктивные свойства изолята на чувствительных биологических системах в сравнении с эпизоотическим штаммом М-96 CMLPV, выделенным ранее на территории Казахстана во время вспышки ОВ 1996 г., а также его аттенуированными вариантами. Выделенному вирусу присвоено условное название М-2020.
Обсуждение. При исследовании в обеих чувствительных системах культивирования (клеточной культуре и РКЭ) штаммы М-96 и его аттенуированные варианты КМ-40, КМ-70, использованные в экспериментах в качестве контроля, продемонстрировали высокую инфекционную активность с титром 4,75–6,75 lg ТЦД50/см3, тогда как для исследуемого изолята вируса ОВ М-2020 указанная величина оказалась существенно ниже (3,00-4,75 lg ТЦД50/см3, p > 0,05).
Список литературы
1. Сатбеков Е.С. Получение и испытание на специфическую активность гипериммунной сыворотки против оспы верблюдов. Вестник сельскохозяйственной науки. 1971; (2): 101–4.
2. Трабаев О. Результаты изучения устойчивости вируса оспы верблюдов в различных условиях внешней среды и при воздействии антибиотиков и дезосредств. В кн.: Труды Алма-Атинского ЗВИ. Том ХХ: Инфекционные и паразитарные заболевания сельскохозяйственных животных. Алма-Ата; 1972: 34–5.
3. Садыков Р.Г. Культивирование вируса оспы верблюдов на куриных эмбрионах. Вирусные болезни сельскохозяйственных животных. 1970; (1): 1–25.
4. Булатов Е.А., Мамадалиев С.М., Мамбеталиев М. Изучение основных биофизических характеристик вируса оспы верблюдов из штамма «М-96». Вестник науки Казахского агротехнического университета им. С. Сейфулина. 2009; (4): 225–9.
5. Булатов Е.А., Мамадалиев С.М., Мамбеталиев М., Битов Н.Т. О циркуляции вируса оспы верблюдов в Мангистауской области Республики Казахстан в скрытой форме. Актуальные вопросы ветеринарной биологии. 2010; (3): 10–3.
6. Султанкулова К.Т., Зайцев В.Л. Вирус оспы верблюдов: биологические свойства, структура генома и диагностика. Морфология и структура вируса. Алматы; 2017: 37–40.
7. Сюрин В.Н. Руководство по ветеринарной вирусологии. Москва: Колос; 1966.
8. Сергеев В.А. Размножение вируса животных в клетках ткани. Москва: Колос; 1966.
9. Marennikova S.S., Shenkman L.S., Shelukhina E.M., Maltseva N.N. Isolation of camel pox virus and investigation of its properties. Acta virologica. 1974; 18(5): 423–8.
10. Afonso C.L., Tulman E.R., Lu Z., Zsak L., Sandybaev N.T., Kerembekova Z.U., et al. The genome of camelpox virus. Virology. 2002; 295(1): 1–9. https://doi.org/10.1006/viro.2001.1343
11. OIE 2019. Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals 2019. Chapter 3.9.2. Camelpox. Paris: World Organisation for Animal Health; 2019: 1665–8.
12. Reed L.J., Muench H. A simple method of estimating fifty percent endpoints. Am. J. Epidemiol. 1938; 27(3): 493–7. https://doi.org/10.1093/oxfordjournals.aje.a118408
13. Tantawi H.H., Saban M.S., Reda I.M., Dahaby H.E. Camel pox virus in Egypt. Isolation and characterization. Bull. Epizoot. Dis. Africa. 1974; 22(4): 315–9.
14. Chauhan R.S., Kaushik R.K. Isolation of camel pox virus in India. Br. Vet. J. 1987; 143(6): 581–2. https://doi.org/10.1016/0007-1935(87)90050-9
15. Marodam V., Nagendrakumar S.B., Tanwar V.K., Thiagarajan D., Reddy G.S., Tanwar R.K., et al. Isolation and identification of camel pox virus. Indian J. Anim. Sci. 2006; 76: 326–7.
16. Ramyar H., Hessami M. Isolation, cultivation and characterization of camel pox virus. Arch. Inst. Razi. 1972; 24: 13–21.
17. Davies F., Mungai J., Shaw T. Characteristics of a Kenyan camelpox virus. J. Hyg. (Lond.). 1975; 75(3): 381–5. https://doi.org/10.1017/s002217240002444x
18. Gitao C.G., Nyaga P.N. Pathogenicity of Camelpox virus strain from Kenya on Camels (Camelus dromedarius). Bull. Anim. Health Prod. Afr. 1995; 43: 247–51.
19. Klopries M., Wernery U., Karden O.-R. Characterisation of the camel skin cell line Dubca. Br. Vet. J. 1995; 151(5): 555–65. https://doi.org/10.1016/s0007-1935(05)80026-0
20. Tantawi H.H., El-Dahaby H., Fanmy L.S. Comparative studies on poxvirus strains isolated from camels. Acta Virol. 1978; 22(6): 451–7.
Problems of Virology. 2022; 67: 77-86
Isolation of a new strain М-2020 of the camelpox virus (Poxviridae: Orthopoxvirus: Camelpox virus) in Republic of Kazakhstan and study of its reproduction in various biological systems
https://doi.org/10.36233/0507-4088-100Abstract
Introduction. This article presents the results of isolation of camel smallpox virus (Poxviridae: Orthopoxvirus: Camelpox virus, CMLPV) and study of its reproductive properties on sensitive biological systems.
Material and methods. The epizootic strain M-96 of the virus as well as its attenuated variants KM-40 and KM-70 obtained by sequential passivation were used in the study. Isolation of the pathogen from suspension of biopsy specimens was performed on cell culture and in embryonated chicken eggs (ECEs). All experiments were performed with the number of replications ensuring obtaining reliable results.
Results. The CMLPV was isolated from the crusts and pox papules of the skin taken from sick camels (Camelus bactrianus) during an outbreak in various districts of the Mangistau region at the end of 2019. The signs of pathogen reproduction on chorio-allantoic membrane (CAM) were observed from 3 passages. The obtained virus caused formation of pathological changes on the CAM in the form of elevated dot or solid white formations separated from the surrounding tissue, with hemorrhagic foci in the center. The reproductive properties of the isolate on sensitive biological systems were determined in comparison with the epizootic CMLPV strain M-96, isolated earlier in the territory of Kazakhstan during the outbreak 23–24 years ago, as well as its attenuated variants. The isolated virus was given the conventional name M-2020.
Discussion. When studied in two sensitive cultivation systems (cell culture and ECEs), strain M-96 and its attenuated variants KM-40, KM-70, which were used in the experiments as a control, demonstrated high infectious activity with titer 4.75-6.75 lg TCID50/cm3, while for the examined isolate M-2020 of CMLPV had the significantly lower values (3.00-4.75 lg TCID50/cm3, p > 0,05).
References
1. Satbekov E.S. Poluchenie i ispytanie na spetsificheskuyu aktivnost' giperimmunnoi syvorotki protiv ospy verblyudov. Vestnik sel'skokhozyaistvennoi nauki. 1971; (2): 101–4.
2. Trabaev O. Rezul'taty izucheniya ustoichivosti virusa ospy verblyudov v razlichnykh usloviyakh vneshnei sredy i pri vozdeistvii antibiotikov i dezosredstv. V kn.: Trudy Alma-Atinskogo ZVI. Tom KhKh: Infektsionnye i parazitarnye zabolevaniya sel'skokhozyaistvennykh zhivotnykh. Alma-Ata; 1972: 34–5.
3. Sadykov R.G. Kul'tivirovanie virusa ospy verblyudov na kurinykh embrionakh. Virusnye bolezni sel'skokhozyaistvennykh zhivotnykh. 1970; (1): 1–25.
4. Bulatov E.A., Mamadaliev S.M., Mambetaliev M. Izuchenie osnovnykh biofizicheskikh kharakteristik virusa ospy verblyudov iz shtamma «M-96». Vestnik nauki Kazakhskogo agrotekhnicheskogo universiteta im. S. Seifulina. 2009; (4): 225–9.
5. Bulatov E.A., Mamadaliev S.M., Mambetaliev M., Bitov N.T. O tsirkulyatsii virusa ospy verblyudov v Mangistauskoi oblasti Respubliki Kazakhstan v skrytoi forme. Aktual'nye voprosy veterinarnoi biologii. 2010; (3): 10–3.
6. Sultankulova K.T., Zaitsev V.L. Virus ospy verblyudov: biologicheskie svoistva, struktura genoma i diagnostika. Morfologiya i struktura virusa. Almaty; 2017: 37–40.
7. Syurin V.N. Rukovodstvo po veterinarnoi virusologii. Moskva: Kolos; 1966.
8. Sergeev V.A. Razmnozhenie virusa zhivotnykh v kletkakh tkani. Moskva: Kolos; 1966.
9. Marennikova S.S., Shenkman L.S., Shelukhina E.M., Maltseva N.N. Isolation of camel pox virus and investigation of its properties. Acta virologica. 1974; 18(5): 423–8.
10. Afonso C.L., Tulman E.R., Lu Z., Zsak L., Sandybaev N.T., Kerembekova Z.U., et al. The genome of camelpox virus. Virology. 2002; 295(1): 1–9. https://doi.org/10.1006/viro.2001.1343
11. OIE 2019. Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals 2019. Chapter 3.9.2. Camelpox. Paris: World Organisation for Animal Health; 2019: 1665–8.
12. Reed L.J., Muench H. A simple method of estimating fifty percent endpoints. Am. J. Epidemiol. 1938; 27(3): 493–7. https://doi.org/10.1093/oxfordjournals.aje.a118408
13. Tantawi H.H., Saban M.S., Reda I.M., Dahaby H.E. Camel pox virus in Egypt. Isolation and characterization. Bull. Epizoot. Dis. Africa. 1974; 22(4): 315–9.
14. Chauhan R.S., Kaushik R.K. Isolation of camel pox virus in India. Br. Vet. J. 1987; 143(6): 581–2. https://doi.org/10.1016/0007-1935(87)90050-9
15. Marodam V., Nagendrakumar S.B., Tanwar V.K., Thiagarajan D., Reddy G.S., Tanwar R.K., et al. Isolation and identification of camel pox virus. Indian J. Anim. Sci. 2006; 76: 326–7.
16. Ramyar H., Hessami M. Isolation, cultivation and characterization of camel pox virus. Arch. Inst. Razi. 1972; 24: 13–21.
17. Davies F., Mungai J., Shaw T. Characteristics of a Kenyan camelpox virus. J. Hyg. (Lond.). 1975; 75(3): 381–5. https://doi.org/10.1017/s002217240002444x
18. Gitao C.G., Nyaga P.N. Pathogenicity of Camelpox virus strain from Kenya on Camels (Camelus dromedarius). Bull. Anim. Health Prod. Afr. 1995; 43: 247–51.
19. Klopries M., Wernery U., Karden O.-R. Characterisation of the camel skin cell line Dubca. Br. Vet. J. 1995; 151(5): 555–65. https://doi.org/10.1016/s0007-1935(05)80026-0
20. Tantawi H.H., El-Dahaby H., Fanmy L.S. Comparative studies on poxvirus strains isolated from camels. Acta Virol. 1978; 22(6): 451–7.
