Два случая гидрофобии в Республике Татарстан: прижизненная и постмортальная лабораторная диагностика

Статья в Elpub

Вопросы вирусологии. 2015; 60: 18-24

Два случая гидрофобии в Республике Татарстан: прижизненная и постмортальная лабораторная диагностика

Хисматуллина Н. А., Гулюкин А. М., Гулюкин М. И., Иванов А. В., Сабирова В. В., Южаков А. Г., Александрова Н. М., Самерханов И. И., Алипер Т. И.

Аннотация

Представлены результаты прижизненной и постмортальной лабораторной диагностики двух случаев гидрофобии в Республике Татарстан: пострадавших от укуса волком в 2002 г. и укушенного бродячей собакой на о. гоа в индии в 2013 г. При исследовании отпечатков с роговицы глаза пострадавшей от укуса волком по методу флюоресцирующих антител (МФА) положительный результат установлен за 6 сут до смерти больной. Полученные результаты подтверждены постмортально исследованием различных отделов головного мозга и слюнных желез по МФА, методом иммуноферментного анализа (ИФА), световой микроскопией и биопробой. При исследованиях проб роговицы глаза пострадавшего от укуса бродячей собаки по МФА, слюны по методу иФА выявлен антиген вируса бешенства, а также в слюне и слезной жидкости - геном вируса бешенства в гнездовой полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией за 9 сут до смерти больного. Результаты прижизненной диагностики больного гидрофобией подтверждены постмортально при исследовании различных отделов головного мозга по МФА, методом ИФА и биопробой. Положительные результаты по прижизненной и постмортальной диагностике подтверждают клинически поставленный диагноз гидрофобии. Результаты анализа последовательности нуклеотидов фрагмента гена G вируса бешенства размером 238 н.о. указали на незначительное отличие изучаемого изолята (2 rabies) от от RABV AY956319, составляющее 1,68%, отличие от вакцинных штаммов «Внуково-32» на 10,5% и SAD B19 на 10,9%, относящихся к вирусам бешенства 1-го генотипа; значительное отличие от лиссаподобных вирусов 2, 4, 5 и 6-го генотипов, составляющее 21-32,7%. Полученные результаты свидетельствуют о филогенетической близости изучаемого изолята (2 rabies) со штаммом RABV AY956319 вируса бешенства, относящегося к 1-му генотипу.

Список литературы

1. Гулюкин М.И., Ведерников В.А. Ситуация уже кризисная. Ветеринарная жизнь. 2008; 12: 6–8.

2. Ведерников В.А., Гулюкин М.И., Рождественский И.К. и др. ред. Обзор эпизоотической ситуации по бешенству в Российской Федерации в 2007 году и I полугодии 2008 г. М.; 2008.

3. Львов Д.К., ред. Руководство по вирусологии. Вирусы и вирусные инфекции человека и животных. М.: Медицинское информационное агенство., 2013.

4. Грибенча С.В., Львов Д.К. Рабдовирусы. В кн.: Медицинская вирусология. М.: МИА, 2008: 586–94.

5. Санитарно-эпидемиологические правила «Профилактика бешенства среди людей», утверждены постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 06.05.2010 г. № 54. М.; 2010.

6. Иванов А.В., Хисматуллина Н.А., Гулюкин А.М. Эпизоотологический и иммунологический надзор за бешенством. Ветеринарный врач. 2010; 4 (17): 3–6.

7. ИА Татар-информ Татарстан лидирует в ПФО по коичеству случаев заболеваний бешенством животных – Росотребнадзор. 2014. Available at: http://news.mail.ru/inregions/volgaregion/16/society/18435445/?frommail=1

8. Ковалев Н.А., Шашенько А.С. Иммунофлуоресцентное исследование отпечатков роговицы при бешенстве. Ветеринария. 1970; 9: 44–6.

9. Zimmermann In. Zur Brauchbarkeit des Cornea testes bei der Tollwut diagnose. Berl. Munch. Tierarztl. Eachr. 1971; 84 (9): 172–4.

10. Laurent D.A. et al. A Reliable Diagnosis of Human Rabies Based on Analysis of Skin Biopsy Specimens. Clin. Infect. Dis. 2008; 47: 1410–17.

11. Баширова Д.К., Хисматуллина Н.А., Шафеев М.Ш., Шакиров Т.Н., Убасев А.Г. и др. Прижизненная клинико-лабораторная диагностика гидрофобии. Казанский медицинский журнал. 2007; 88 (5): 449–52.

12. Тимиргалеев Р.В. Усовершенствование методов идентификации вируса бешенства и выявления антирабических антител: Автореф. дис…. канд. вет. наук. Казань; 2006.

13. Грибенча С.В., Козлов А.Ю., Костина Л.В., Елаков А.Л., Лосич М.А., Цибезов В.В., Забережный А.Д., Алипер Т.И. Получение моноклональных антител к нуклеопротеину вируса бешенства. Вопросы вирусологии. 2013; 5: 38–43.

14. Wakeley P.R., Johnson N., McElhinney L.M. Development of a realtime, TaqMan reverse Transcription-PCR assay for detection and differentiation of Lyssavirus genotypes 1, 5 and 6. J. Clin. Microbiol. 2005; 43 (6): 2786–92.

15. Мовсесянц А.А., Бектимиров Т.А. Гидрофобия у людей, леченных специфическими иммунопрепаратами. Ветеринарная патология. 2002; 1: 40.

16. Ботвинкин А.Д., Селимов М.А., Згурская Т.Н. Обнаружение антител к вирусу бешенства в сыворотке крови людей с помощью иммуноферментного метода. Вопросы вирусологии. 1986; 31 (3): 333–4.

17. Хисматуллина Н.А. Разработка и усовершенствование лабораторных методов диагностики бешенства: Автореф. дисс. … канд. биол. наук. Казань; 1989.

18. Хисматуллина Н.А., Юсупов Р.Х., Селимов М.А., Янбарисова С.Р. Разработка средств и методов иммунологического мониторинга при бешенстве. Вопросы вирусологии. 2001; 5: 45–8.

19. Гулюкин А.М. Значимость современных методов лабораторной диагностики и идентификации возбудителя бешенства для иммунологического мониторинга данного зооноза. Вопросы вирусологии. 2014; 3: 5–10.

20. Nicholson K.G., Prestage K. Enzyme-linked immunosorbent Assay:A Peaped Reproducible. Test for the Measurement of Rabies Antibody. J. Med. Virol. 1982: 43–9.

21. Cliquet F., Sagne L., Schereffer J. L. & Aubert M.F.A.. ELISA tests for rabies antibody titration in orally vaccinated foxes sampled in the fields. Vaccine. 2000; 18: 3272–9.

22. Селимов М.А. Бешенство. М: Медицина. 1978.

23. Иванов А.В., Хисматуллина Н.А., Юсупов Р.Х., Морозов В.В., Хисамутдинов Ф.Ф., Чернов А.Н. и др. Эпизоотологоэпидемиологический надзор за бешенством. Методическое руководство. Казань: ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ»; 2007.

24. King A.M.Q., Adams M.J., Carstens E.B., Lefkowitz E.J., eds. Virus Taxonomy. Ninth Report of the International Committee on Taxonomy of Viruses. International Union of Microbiological Societies. Virology Division. Amsterdam: ELSEVIER ACADEMIC PRESS; 2011.

25. Иванов А.В., Хисматуллина Н.А., Чернов А.Н., Гулюкин А.М. Бешенство: Этиология, Эпизоотология. Диагностика. Учебнометодическое пособие в иллюстрациях. М.: «Колос»; 2010.

26. Набор синтетических олигонуклеотидных праймеров для выявления РНК вируса бешенства и способ выявления РНК вируса бешенства с помощью синтетических олигонуклеотидных праймеров в полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР). Заявка на патентование изобретения в ФГБУ ФИПС Рег. № 2014139999.

Problems of Virology. 2015; 60: 18-24

Two cases of hydrophobia in the Republic of Tatarstan: in vivo and postmortem laboratory diagnosis

Khismatullina N. A., Gulyukin A. M., Gulyukin M. I., Ivanov A. V., Sabirova V. V., Yuzhakov A. G., Alexandrova N. M., Samerkhanov I. I., Aliper T. I.

Abstract

The results of rabies in vivo and postmortem laboratory detection in two cases registered in the Republic of Tatarstan are reported: a victim bitten by a wolf in 2002 and another one bitten by a stray dog on Goa island, india, in 2013. In the patient bitten by a wolf cornea imprints studies using the method of fluorescent antibodies (MFA) showed rabies-positive result 6 days before the patient's death. The results were confirmed by postmortem examination of different parts of the brain and salivary glands using the MFA, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), optical microscopy, and bioassay methods. in the patient bitten by a stray dog the rabies virus specific antigen was detected by eye cornea studies using the MFA method and saliva studies using the ELISA. The rabies virus genome was also isolated from saliva and tear fluid using nested reverse-transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) 9 days before the patient's death. The in vivo studies results were consistent with the postmortem study of different parts of the brain using the MFA, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), optical microscopy, and bioassay methods. All the infection-positive results of both in vivo and postmortem studies were consistent with the clinical studies, i. e. rabies diagnosis was confirmed. The analysis of the rabies virus gene G fragment nucleotide sequence of 238 nd length showed a slight difference between the studied isolates (2 rabies) and the RABV AY956319 (1.68%), difference by 10.5% from the Vnukovo-32 vaccine strains and by 10.9 % from the SAD B19 rabies strain, respectively (rabies viruses of 1st genotype). It was also significantly different from the lissaviruses of 2, 4, 5, and 6 genotypes (21.0-32.7%). The obtained results indicate phylogenetic closeness of the studied isolates (2 rabies) with the RABV AY956319 rabies virus strain belonging to the 1st genotype.

References

1. Gulyukin M.I., Vedernikov V.A. Situatsiya uzhe krizisnaya. Veterinarnaya zhizn'. 2008; 12: 6–8.

2. Vedernikov V.A., Gulyukin M.I., Rozhdestvenskii I.K. i dr. red. Obzor epizooticheskoi situatsii po beshenstvu v Rossiiskoi Federatsii v 2007 godu i I polugodii 2008 g. M.; 2008.

3. L'vov D.K., red. Rukovodstvo po virusologii. Virusy i virusnye infektsii cheloveka i zhivotnykh. M.: Meditsinskoe informatsionnoe agenstvo., 2013.

4. Gribencha S.V., L'vov D.K. Rabdovirusy. V kn.: Meditsinskaya virusologiya. M.: MIA, 2008: 586–94.

5. Sanitarno-epidemiologicheskie pravila «Profilaktika beshenstva sredi lyudei», utverzhdeny postanovleniem Glavnogo gosudarstvennogo sanitarnogo vracha Rossiiskoi Federatsii ot 06.05.2010 g. № 54. M.; 2010.

6. Ivanov A.V., Khismatullina N.A., Gulyukin A.M. Epizootologicheskii i immunologicheskii nadzor za beshenstvom. Veterinarnyi vrach. 2010; 4 (17): 3–6.

7. IA Tatar-inform Tatarstan lidiruet v PFO po koichestvu sluchaev zabolevanii beshenstvom zhivotnykh – Rosotrebnadzor. 2014. Available at: http://news.mail.ru/inregions/volgaregion/16/society/18435445/?frommail=1

8. Kovalev N.A., Shashen'ko A.S. Immunofluorestsentnoe issledovanie otpechatkov rogovitsy pri beshenstve. Veterinariya. 1970; 9: 44–6.

9. Zimmermann In. Zur Brauchbarkeit des Cornea testes bei der Tollwut diagnose. Berl. Munch. Tierarztl. Eachr. 1971; 84 (9): 172–4.

10. Laurent D.A. et al. A Reliable Diagnosis of Human Rabies Based on Analysis of Skin Biopsy Specimens. Clin. Infect. Dis. 2008; 47: 1410–17.

11. Bashirova D.K., Khismatullina N.A., Shafeev M.Sh., Shakirov T.N., Ubasev A.G. i dr. Prizhiznennaya kliniko-laboratornaya diagnostika gidrofobii. Kazanskii meditsinskii zhurnal. 2007; 88 (5): 449–52.

12. Timirgaleev R.V. Usovershenstvovanie metodov identifikatsii virusa beshenstva i vyyavleniya antirabicheskikh antitel: Avtoref. dis…. kand. vet. nauk. Kazan'; 2006.

13. Gribencha S.V., Kozlov A.Yu., Kostina L.V., Elakov A.L., Losich M.A., Tsibezov V.V., Zaberezhnyi A.D., Aliper T.I. Poluchenie monoklonal'nykh antitel k nukleoproteinu virusa beshenstva. Voprosy virusologii. 2013; 5: 38–43.

15. Movsesyants A.A., Bektimirov T.A. Gidrofobiya u lyudei, lechennykh spetsificheskimi immunopreparatami. Veterinarnaya patologiya. 2002; 1: 40.

16. Botvinkin A.D., Selimov M.A., Zgurskaya T.N. Obnaruzhenie antitel k virusu beshenstva v syvorotke krovi lyudei s pomoshch'yu immunofermentnogo metoda. Voprosy virusologii. 1986; 31 (3): 333–4.

17. Khismatullina N.A. Razrabotka i usovershenstvovanie laboratornykh metodov diagnostiki beshenstva: Avtoref. diss. … kand. biol. nauk. Kazan'; 1989.

18. Khismatullina N.A., Yusupov R.Kh., Selimov M.A., Yanbarisova S.R. Razrabotka sredstv i metodov immunologicheskogo monitoringa pri beshenstve. Voprosy virusologii. 2001; 5: 45–8.

19. Gulyukin A.M. Znachimost' sovremennykh metodov laboratornoi diagnostiki i identifikatsii vozbuditelya beshenstva dlya immunologicheskogo monitoringa dannogo zoonoza. Voprosy virusologii. 2014; 3: 5–10.

20. Nicholson K.G., Prestage K. Enzyme-linked immunosorbent Assay:A Peaped Reproducible. Test for the Measurement of Rabies Antibody. J. Med. Virol. 1982: 43–9.

21. Cliquet F., Sagne L., Schereffer J. L. & Aubert M.F.A.. ELISA tests for rabies antibody titration in orally vaccinated foxes sampled in the fields. Vaccine. 2000; 18: 3272–9.

22. Selimov M.A. Beshenstvo. M: Meditsina. 1978.

23. Ivanov A.V., Khismatullina N.A., Yusupov R.Kh., Morozov V.V., Khisamutdinov F.F., Chernov A.N. i dr. Epizootologoepidemiologicheskii nadzor za beshenstvom. Metodicheskoe rukovodstvo. Kazan': FGU «FTsTRB-VNIVI»; 2007.

25. Ivanov A.V., Khismatullina N.A., Chernov A.N., Gulyukin A.M. Beshenstvo: Etiologiya, Epizootologiya. Diagnostika. Uchebnometodicheskoe posobie v illyustratsiyakh. M.: «Kolos»; 2010.

26. Nabor sinteticheskikh oligonukleotidnykh praimerov dlya vyyavleniya RNK virusa beshenstva i sposob vyyavleniya RNK virusa beshenstva s pomoshch'yu sinteticheskikh oligonukleotidnykh praimerov v polimeraznoi tsepnoi reaktsii s obratnoi transkriptsiei (OT-PTsR). Zayavka na patentovanie izobreteniya v FGBU FIPS Reg. № 2014139999.