Офтальмохирургия. 2015; : 13-16
Dexamethasone impact on vimentin in human lens epithelial cells
https://doi.org/undefinedАннотация
Цель. Исследовать экспрессию виментина (vimentin) при воздействии дексаметазона (Декс) в эпителиальных клетках хрусталика человека (ЭКХЧ), и роль экспрессии виментина в образовании катаракты, вызванной стероидами (КВС).
Материал и методы. Эпителиальные клетки хрусталика человека (ЭКХЧ) помещались в среду DMEM и среду DMEM + 1umol/L Dex (Декс) на 7 дней. Для выявления экспрессии виментина на уровни белка и транскрипции применялась методика ПЦР в реальном времени (Real-time PCR) и Вестерн-блот-анализ (Western-blot). Распределение и экспрессия виментина в ЭКХЧ измерялись с помощью иммунофлуоресцентного окрашивания.
Результаты. Результаты ПЦР в реальном времени показали, что в группе Декс по сравнению с контрольной группой экспрессия виментина мРНК снижается статистически достоверно с разницей между группами (р<0,05). Результаты Вестерн-блот-анализа показывают, что в группе Декс, по сравнению с контрольной группой, экспрессия белка виментина уменьшается, существенно отличаясь между группами (р<0,05), различие было статистически достоверно, предполагаем, что Декс может снизить экспрессию виментина. Иммунофлуоресцентное окрашивание показало, что в группе Декс экспрессия виментина значительно снижалась по сравнению с контрольной группой, что согласуется с результатами при использовании Вестерн-блот-анализа.
Заключение. Дексаметазон может вызывать экспрессию виментина в эпителиальных клетках хрусталика человека, что может являться причиной аномальной пролиферации и дифференциации эпителиальных клеток хрусталика, в конечном счете приводящим к образованию стероидной катаракты.
Список литературы
1. Cho S.H., Na K.S. Haemangioendothelioma on the conjunctiva of the upper eyelid // Clin. Experiment Ophthalmol. – 2006. – Vol. 34, № 8. – P. 794-796.
2. Ernst P., Baltzan M., Deschênes J., Suissa S. Low-dose inhaled and nasal corticosteroid use and the risk of cataracts // Eur. Respir. – 2006. – Vol. 27, № 6. – 1168-1174.
3. Gupta V., Galante A., Soteropoulos P. et al. Global gene profiling reveals novel glucocorticoid induced changes in gene expression of human lens epithelial cells // Mol. Vis. – 2005. – Vol. 11. – P. 1018-1040.
4. Ivaska J., Pallari H.M., Nevo J., Erikssion J.E. Novel functions of vimentin in cell adhesion, migration, and signaling // Exp. Cell. Res. – 2007. – Vol. 313, № 10. – P. 2050-2062.
5. Lyu J., Kim J. A., Chung S.K. et al. Alteration of cadherin in dexamethasoneinduced cataract organ-cultured rat lens // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. – 2003. – Vol. 44 (5). – P. 2034-2040.
6. Nitta T., Kim J.S., Mohuczy D., Behrns K.E. Murine cirrhosis induces hepatocyte epithelial mesenchymal transition and alterations in survival signaling pathways // Hepatology. – 2008. – Vol. 48, № 3. – P. 909-919.
7. Vasavada A.R., Mamidipudi P.R., Sharma P.S. Morphology of and visual performance with posterior subcapsular cataract // Cataract Refract. Surg. – 2004. – Vol. 30, № 10. – Р. 2097-2104.
8. Xie G.L., Yan H., Lu Z.F. Inhibition of glucocorticoid-induced alteration of vimentin by a glucocorticoid receptor antagonist RU486 in the organ-cultured rat lens // Mol. Vis. – 2011. – Vol. 17. – P. 32-40.
9. Yang L., Jiang Y., Wu S.F. et al. CCAAT/enhancer-binding protein alpha antagonizes transcriptional activity of hypoxia-inducible factor 1 alpha with direct protein-proteininteraction // Carcinogenesis. – 2008. – Vol. 29, № 2. – Р. 291-298.
Fyodorov Journal of Ophthalmic Surgery. 2015; : 13-16
Dexamethasone impact on vimentin in human lens epithelial cells
https://doi.org/undefinedAbstract
Purpose. To study the expression of vimentin on the impact of dexamethasone (Dex) in human lens epithelial cells (HLECs), and the role of vimentin expression in steroid-induced cataract (GIC) formation.
Material and methods. HLECs were exposed to DMEM and DMEM + 1umol/L Dex for 7 days. Real-time PCR and Western-blot were applied to identify the expression of vimentin at protein and transcription levels. The distribution and expression of vimentin in HLECs were measured by immumoflorescence staining.
Results. Real-time PCR results showed that Dex group than the control group vimentin mRNA expression is decreased significantly different between groups (p<0.05), the difference was statistically significant. Western-blot results show that Dex group than the control group vimentin protein expression is decreased significantly different between groups (p<0.05), the difference was statistically significant, suggesting Dex can reduce the expression of vimentin. Immunofluorescence staining showed that Dex group than the control group vimentin expression is decreased significantly, which consistent with the Western-blot results.
Conclusion. Dex can induce expression of vimentin in HLECs, which may cause abnormal lens epithelial cell proliferation and differentiation, eventually leading to the formation of GIC.
References
1. Cho S.H., Na K.S. Haemangioendothelioma on the conjunctiva of the upper eyelid // Clin. Experiment Ophthalmol. – 2006. – Vol. 34, № 8. – P. 794-796.
2. Ernst P., Baltzan M., Deschênes J., Suissa S. Low-dose inhaled and nasal corticosteroid use and the risk of cataracts // Eur. Respir. – 2006. – Vol. 27, № 6. – 1168-1174.
3. Gupta V., Galante A., Soteropoulos P. et al. Global gene profiling reveals novel glucocorticoid induced changes in gene expression of human lens epithelial cells // Mol. Vis. – 2005. – Vol. 11. – P. 1018-1040.
4. Ivaska J., Pallari H.M., Nevo J., Erikssion J.E. Novel functions of vimentin in cell adhesion, migration, and signaling // Exp. Cell. Res. – 2007. – Vol. 313, № 10. – P. 2050-2062.
5. Lyu J., Kim J. A., Chung S.K. et al. Alteration of cadherin in dexamethasoneinduced cataract organ-cultured rat lens // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. – 2003. – Vol. 44 (5). – P. 2034-2040.
6. Nitta T., Kim J.S., Mohuczy D., Behrns K.E. Murine cirrhosis induces hepatocyte epithelial mesenchymal transition and alterations in survival signaling pathways // Hepatology. – 2008. – Vol. 48, № 3. – P. 909-919.
7. Vasavada A.R., Mamidipudi P.R., Sharma P.S. Morphology of and visual performance with posterior subcapsular cataract // Cataract Refract. Surg. – 2004. – Vol. 30, № 10. – R. 2097-2104.
8. Xie G.L., Yan H., Lu Z.F. Inhibition of glucocorticoid-induced alteration of vimentin by a glucocorticoid receptor antagonist RU486 in the organ-cultured rat lens // Mol. Vis. – 2011. – Vol. 17. – P. 32-40.
9. Yang L., Jiang Y., Wu S.F. et al. CCAAT/enhancer-binding protein alpha antagonizes transcriptional activity of hypoxia-inducible factor 1 alpha with direct protein-proteininteraction // Carcinogenesis. – 2008. – Vol. 29, № 2. – R. 291-298.
