Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2019; : 32-38
Серологические методы выявления возбудителя туляремии и их оценка
https://doi.org/10.36233/0372-9311-2019-4-32-38Аннотация
Цель. Сравнительный анализ серологических методов выявления возбудителя туляремии и их оценка. Материалы и методы. Использованы экспериментальные диагностические наборы и тест-системы для постановки серологических методов: реакции непрямой гемагглютинации (РНГА); реакции иммунофлуоресценции (РИФ); иммуноферментного анализа (ИФА) традиционного с использованием микропланшет; ИФА после селективного концентрирования возбудителя туляремии на магноиммуносорбенте (МИС); реакции микрогравиметрического анализа (МГА) на основе пьезобиосенсоров (ПБ) и поверхностного плазмонного резонанса (ППР). Эксперименты проводили с гомологичными штаммами туляремийного микроба (тест-штаммами) и со штаммами гетерологичных микроорганизмов в модельных опытах на водопроводной воде, контаминированной различной концентрацией патогена. Результаты. Определены параметры каждого диагностического метода и дана оценка по показателям: чувствительности (при работе с чистыми культурами (тест-штаммами), загрязненными пробами больших объемов), специфичности, времени постановки и учета результатов, информативности, определения режимов постановки и учета. Заключение. Вышеперечисленные методы диагностики имеют свои достоинства и недостатки, поэтому при выборе того или иного метода исследователь должен руководствоваться своими целями. Так, для скрининговых исследований целесообразно проводить постановку ИФА, РИФ, РНГА; при выявлении возбудителя в больших объемах и загрязненных пробах эффективно применение селективного концентрирования на МИС с последующей постановкой ИФА; для выявления незначительных объемов проб и учета реакции в реальном времени возможно применение МГА и ППР.
Список литературы
1. Ермолаева Т.Н., Калмыкова Е.Н., Шашканова О.Ю. Пьезокварцевые биосенсоры для анализа объектов окружающей среды, пищевых продуктов и для клинической диагностики. Российский химический журнал, 2008, 3 (2): 17-29.
2. Долгов В.В. Иммунохимический анализ в лабораторной медицине. Учебное пособие: Изд-во «Триада», 2015: 34-38.
3. Кальной С.М., Жарникова И.В., Дикова С.П., Ляпустина Л.В., Ковалев Д.А., Писаренко С.В., Жарникова Т.В., Куличенко А.Н. Заявка № 2012114858/10, 13.04.2012. Способ получения микрогравиметрического иммуносенсора. Патент РФ № 2510830, 10.04.2014. Бюл. № 10.
4. Тюменцева И.С., Жарникова И.В., Афанасьев Е.Н. и др. Научно-методические разработки биотехнологий производства иммунобиологических препаратов для экспресс-диагностики инфекционных заболеваний и детекции их возбудителей. Биопрепараты. Профилактика. Диагностика. Лечение, 2015, 4: 21-26.
5. Тюменцева И.С., Афанасьев Е.Н., Старцева О.Л., Курчева С.А., Жарникова И.В., Гаркуша Ю.Ю., Жданова Е.В., Кальной С.М. Разработка стандартных условий биотехнологии производства иммуномагнитного сорбента для экспресс-диагностики опасных инфекционных заболеваний. Технологии живых систем. 2017, 2: 52-58.
6. Тюменцева И.С., Курчева С.А., Афанасьев Е.Н., Жарникова И.В., Жданова Е.В., Старцева О.Е., Гаркуша Ю.Ю., Семирчева А.А. Особенности пробоподготовки с использованием иммуномагнитного сорбента при исследовании полевого материала на наличие возбудителя чумы. Военно-медицинский журнал. 2018, 339 (5): 42-46.
7. Хаиров С.Г., Юсупов О.Ю., Яникова Э.А. Заявка № 2012101543/10, 17.01.2012. Способ получения эритроцитарного антительного овисного диагностикума для реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) с целью индикации овисного антигена в биоматериале. Патент РФ № 2509306, 10.03.2014. Бюл. № 7.
8. Gall D., Nielsen K., Forbes L. et al. Alidation of the fluorescence polarization assay and comparison to other serological assays for the detection of serum antibodies to Brucella abortus in bison. J. Wildl. Dis. 2000, 36 (3): 76-469.
9. Pohanka M., Skladal B. Piezoelectric Immunosensor for the Direct and Rapid Detection of Francisella tularensis. Foilia Microbiol. 2007, 52 (4): 325-330.
10. Sting R., Ortmann G. Erfahrungen mit einfachen ELISA-Testsystemes fur die Brucellose — Serologie bei Rind, Schaf und Ziege. Berlin. Und munch. Wochenschr 2000, 113 (1): 22-28.
Journal of microbiology, epidemiology and immunobiology. 2019; : 32-38
Serological methods for detection of the causative agent of tularemia and their evaluation
https://doi.org/10.36233/0372-9311-2019-4-32-38Abstract
Aim. A comparative study of serological methods for the detection of the causative agent of tularemia and their evaluation. Materials and methods. We used experimental diagnostic kits and test systems for the production of serological methods: indirect hemagglutination reaction (RGA); the reaction immunofluorescence (RIF); enzyme immunoassay (ELISA) using traditional microplate; IFA after selective concentration of the pathogen of tularemia in magnoimmunosorbents (MIS); microgravimetric analysis (MGA) based on piezoresistors (SP) and surface plasmon resonance (SPR). The experiments were carried out with homologous strains of tularemia microbe (test strains) and with strains of heterologous microorganisms in model experiments on tap water contaminated with different concentrations of the pathogen. Results. The parameters of each diagnostic method are determined and evaluated according to the following indicators: sensitivity (when working with pure cultures (test strains), contaminated samples of large volumes), specificity, time of setting and taking into account the results, informativeness, determining the modes of setting and accounting. Conclusion. The above diagnostic methods have their advantages and disadvantages. Therefore, when choosing a method, the researcher should be guided by the goals pursued. So, for screening studies it is advisable to carry out the formulation of ELISA, RIF, RGA, in identifying the pathogen in large volumes and contaminated samples, the effective use of selective concentration on MIS followed by the formulation of ELISA, to identify small amounts of samples and take into account the reaction in real time, it is possible to use MGA and SPR.
References
1. Ermolaeva T.N., Kalmykova E.N., Shashkanova O.Yu. P'ezokvartsevye biosensory dlya analiza ob\"ektov okruzhayushchei sredy, pishchevykh produktov i dlya klinicheskoi diagnostiki. Rossiiskii khimicheskii zhurnal, 2008, 3 (2): 17-29.
2. Dolgov V.V. Immunokhimicheskii analiz v laboratornoi meditsine. Uchebnoe posobie: Izd-vo «Triada», 2015: 34-38.
3. Kal'noi S.M., Zharnikova I.V., Dikova S.P., Lyapustina L.V., Kovalev D.A., Pisarenko S.V., Zharnikova T.V., Kulichenko A.N. Zayavka № 2012114858/10, 13.04.2012. Sposob polucheniya mikrogravimetricheskogo immunosensora. Patent RF № 2510830, 10.04.2014. Byul. № 10.
4. Tyumentseva I.S., Zharnikova I.V., Afanas'ev E.N. i dr. Nauchno-metodicheskie razrabotki biotekhnologii proizvodstva immunobiologicheskikh preparatov dlya ekspress-diagnostiki infektsionnykh zabolevanii i detektsii ikh vozbuditelei. Biopreparaty. Profilaktika. Diagnostika. Lechenie, 2015, 4: 21-26.
5. Tyumentseva I.S., Afanas'ev E.N., Startseva O.L., Kurcheva S.A., Zharnikova I.V., Garkusha Yu.Yu., Zhdanova E.V., Kal'noi S.M. Razrabotka standartnykh uslovii biotekhnologii proizvodstva immunomagnitnogo sorbenta dlya ekspress-diagnostiki opasnykh infektsionnykh zabolevanii. Tekhnologii zhivykh sistem. 2017, 2: 52-58.
6. Tyumentseva I.S., Kurcheva S.A., Afanas'ev E.N., Zharnikova I.V., Zhdanova E.V., Startseva O.E., Garkusha Yu.Yu., Semircheva A.A. Osobennosti probopodgotovki s ispol'zovaniem immunomagnitnogo sorbenta pri issledovanii polevogo materiala na nalichie vozbuditelya chumy. Voenno-meditsinskii zhurnal. 2018, 339 (5): 42-46.
7. Khairov S.G., Yusupov O.Yu., Yanikova E.A. Zayavka № 2012101543/10, 17.01.2012. Sposob polucheniya eritrotsitarnogo antitel'nogo ovisnogo diagnostikuma dlya reaktsii nepryamoi gemagglyutinatsii (RNGA) s tsel'yu indikatsii ovisnogo antigena v biomateriale. Patent RF № 2509306, 10.03.2014. Byul. № 7.
8. Gall D., Nielsen K., Forbes L. et al. Alidation of the fluorescence polarization assay and comparison to other serological assays for the detection of serum antibodies to Brucella abortus in bison. J. Wildl. Dis. 2000, 36 (3): 76-469.
9. Pohanka M., Skladal B. Piezoelectric Immunosensor for the Direct and Rapid Detection of Francisella tularensis. Foilia Microbiol. 2007, 52 (4): 325-330.
10. Sting R., Ortmann G. Erfahrungen mit einfachen ELISA-Testsystemes fur die Brucellose — Serologie bei Rind, Schaf und Ziege. Berlin. Und munch. Wochenschr 2000, 113 (1): 22-28.
