Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2019; 1: 111-115
ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ КОМПЛЕКСНОГО ПРЕПАРАТА ПРОТИВ ГЕМОФИЛЬНОЙ ИНФЕКЦИИ
Ястребова Н. Е., Токарская М. М., Елкина С. И., Овечко Н. Н., Барановская С. А.
https://doi.org/10.36233/0372-9311-2019-1-111-115Аннотация
Цель. Изучение иммунобиологической активности комплексного препарата, предназначенного для профилактики гемофильной инфекции. Материалы и методы. В работе использованы комплексный препарат, содержащий 1 мкг липоолигосахарида (ЛОС) и 10 мкг белоксодержащей фракции (БСФ), а также монопрепараты ЛОС, БСФ и препарат капсульного полисахарида. Для изучения протективной активности комплексного препарата аутбредным мышам массой 14-16 г вводили однократно внутримышечно 0,5 мл (доза) препарата. Через 10 дней животных заражали живыми культурами Haemophilus influenzae капсульного и бескапсульных штаммов в дозе 5×109 микр.кл./мышь. Уровень специфических антител у иммунизированных животных выявляли в непрямом варианте ИФА. Для изучения влияния комплексного препарата на развитие инфекционного процесса иммунизированных мышей интраназально заражали культурами капсульного и нетипируемого штаммов H. influenzae. Вскрытие животных проводили через 3, 24, 48 и 72 часа. Стерильно отобранный материал (ткань легкого) гомогенизировали, титровали, мерно высевали на чашки Петри и через 18-20 часов культивирования производили подсчет выросших колоний бактерий, после чего пересчитывали число бактерий на мышь. Результаты. Исследования показали, что комплексный препарат обеспечивал защиту 90-100% животных от штаммов возбудителя, использованных в опыте. Иммунизация мышей препаратом приводила к значимому увеличению уровня специфических антител, выявляемых в непрямом варианте ИФА. При интраназальном заражении в контрольной группе, начиная с третьих суток, наблюдалось размножение возбудителя в легких. При этом у иммунизированных мышей количество бактерий, высеваемых из ткани легких, было незначительным в те же сроки наблюдения. Практически у всех мышей контрольной группы возбудитель выделяли из лимфатических узлов, брыжейки, у иммунных мышей этот показатель был значимо ниже. Заключение. Комплексный препарат защищал животных от всех заражающих штаммов возбудителя. Динамика формирования инфекционного процесса напрямую зависела от развития иммунного ответа на введение комплексного препарата.
Список литературы
1. Варбанец Л.Д., Здоровенко Г.М., Книрель Ю.А. Методы исследования эндотоксинов. Киев, Наукова думка, 2006.
2. Головинская О.В. Иммунобиологические свойства различных углеводсодержащих препаратов Haemophilus influenzae. Автореф. дисc. канд. мед. наук. М., 2011.
3. Ефремова В.Е., Егорова Н.Б. Токсичность и протективная активность комплексного антигена стафилококка, полученного методом водной экстракции. Журн. микробиол. 1978, 12:59-63.
4. Онищенко Г.Г. Заболеваемость инфекциями, управляемыми средствами специфической профилактики, в Российской Федерации и задачи по их снижению и ликвидации. Журн. микробиол. 2003, 2:16-28.
5. Овечко Н.Н., Ястребова Н.Е. Антигены поверхностных структур Hаemophilus influenzae как перспективные кандидат-вакцины, Журн. микробиол. 2017, 4:82-90.
6. Hoover J.L., Lewandowski T.F., Mininger C.L. et al. A robust pneumonia model in immunocompetent rodents to evaluate antibacterial efficacy against S. pneumoniae, H. influenzae, K. pneumoniae, P. aeruginosa or A. baumannii. J. Visualized Experiments. 2017, 119, e55068, doi:10.3791/55068.
7. Murphy T.F. Vaccines for nontypeable Haemophilus influenzae: the Future Is Now. Clin. Vaccine Immunol. 2015, May; 22(5): 459-466.
8. Sunakawa K., Takeuchi Y., Iwata S. Nontypeable Haemophilus influenzaе (NTHi) epidemiology. Kansenshogaku Zasshi. 2011, May;85(3) : 227-237.
Journal of microbiology, epidemiology and immunobiology. 2019; 1: 111-115
THE IMMUNOBIOLOGICAL ACTIVITY OF THE COMPLEX PREPARATION AGAINST HAEMOPHILUS INFLUENZAE INFECTION
Yastrebova N. E., Tokarskaya M. M., Elkina S. I., Ovechko N. N., Baranovskaya S. A.
https://doi.org/10.36233/0372-9311-2019-1-111-115Abstract
Aim. To study the immunobiological activity of the complex preparation for Haemophilus influenzae infections prevention. Materials and methods. We used the complex preparation, containing 1 mcg of lipooligosaccharide and 10 mcg of protein-containing fraction, lipooligosaccharide and protein-containing fraction monopreparations, and capsular polysaccharide preparation. For studying cross-protective activity of the complex preparation white outbread mouses (weight 14-16 g) were intramuscularly immunized with a dose 0,5 ml. 10 days later the animals were inoculated with H. influenzae encapsulated and non-typed strains culture inoculum in a dose 5*109 microbial cells/mouse. The immunized animals specific antibodies level was determined by means of indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). For studying complex preparation’s influence on the development of the infectious process immunized mouses were intranasally inoculated with H. influenzae encapsulated and non-encapsulated strains. The mouses dissections were performed in 3, 24 and 72 hours after inoculation. Sterile samples (lung tissue) were homogenized, titrated and plated onto 5% horse blood agar; then after 18-20 growth hours we counted the number of colonies and recalculated its number for one mouse. Results. Our investigations have shown that the complex preparation provided 90-100% animals’ defence from used in this experiment infectious agent strains. Mouses immunization with the preparation induced significant increase in the level of antibodies, revealed by means of indirect ELISA. Beginning with the third day after intranasal inoculation there was a pathogen multiplica112 tion in control group mouses lungs. In the same time immunized mouses had almost indetectable number of bacteria. Almost all animals from control group contained pathogen in lymph nodes and mesentery; though pathogen’s presence in immune mouses viscera was rather occasional. Conclusion. The complex preparation protected animals from all H. influenzae strains, used in our experiment. The dynamic of the infectious process directly depended on the development of immune response on the complex preparation injection.
References
1. Varbanets L.D., Zdorovenko G.M., Knirel' Yu.A. Metody issledovaniya endotoksinov. Kiev, Naukova dumka, 2006.
2. Golovinskaya O.V. Immunobiologicheskie svoistva razlichnykh uglevodsoderzhashchikh preparatov Haemophilus influenzae. Avtoref. disc. kand. med. nauk. M., 2011.
3. Efremova V.E., Egorova N.B. Toksichnost' i protektivnaya aktivnost' kompleksnogo antigena stafilokokka, poluchennogo metodom vodnoi ekstraktsii. Zhurn. mikrobiol. 1978, 12:59-63.
4. Onishchenko G.G. Zabolevaemost' infektsiyami, upravlyaemymi sredstvami spetsificheskoi profilaktiki, v Rossiiskoi Federatsii i zadachi po ikh snizheniyu i likvidatsii. Zhurn. mikrobiol. 2003, 2:16-28.
5. Ovechko N.N., Yastrebova N.E. Antigeny poverkhnostnykh struktur Haemophilus influenzae kak perspektivnye kandidat-vaktsiny, Zhurn. mikrobiol. 2017, 4:82-90.
6. Hoover J.L., Lewandowski T.F., Mininger C.L. et al. A robust pneumonia model in immunocompetent rodents to evaluate antibacterial efficacy against S. pneumoniae, H. influenzae, K. pneumoniae, P. aeruginosa or A. baumannii. J. Visualized Experiments. 2017, 119, e55068, doi:10.3791/55068.
7. Murphy T.F. Vaccines for nontypeable Haemophilus influenzae: the Future Is Now. Clin. Vaccine Immunol. 2015, May; 22(5): 459-466.
8. Sunakawa K., Takeuchi Y., Iwata S. Nontypeable Haemophilus influenzae (NTHi) epidemiology. Kansenshogaku Zasshi. 2011, May;85(3) : 227-237.
События
-
Журнал «Современная наука и инновации» принят в DOAJ >>>
28 июл 2025 | 08:36 -
К платформе Elpub присоединились 4 журнала КФУ >>>
24 июл 2025 | 08:39 -
Журнал «Advanced Engineering Research (Rostov-on-Don)» вошел в Russian Science Citation Index >>>
23 июл 2025 | 08:38 -
Журнал «Літасфера» присоединился к Elpub! >>>
22 июл 2025 | 11:00 -
К платформе Elpub присоединился журнал «Труды НИИСИ» >>>
21 июл 2025 | 10:43