ВОЗМОЖНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ MALDI-TOF МАСС-СПЕКРОМЕТРИИ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ УГЛЕВОД-СПЕЦИФИЧЕСКИХ РЕЦЕПТОРОВ ДИАГНОСТИЧЕСКОГО БАКТЕРИОФАГА ЭЛЬТОР

Главная

Статья в Elpub

РУС ENG

Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2016; : 85-90

ВОЗМОЖНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ MALDI-TOF МАСС-СПЕКРОМЕТРИИ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ УГЛЕВОД-СПЕЦИФИЧЕСКИХ РЕЦЕПТОРОВ ДИАГНОСТИЧЕСКОГО БАКТЕРИОФАГА ЭЛЬТОР

Телесманич Н. Р., Гончаренко Е. В., Чайка С. О., Чайка И. А., Теличева В. О.

https://doi.org/10.36233/0372-9311-2016-2-85-90

Аннотация

Цель. Изучение механизмов взаимодействия диагностического бактериофага эльтор с чувствительным к нему штаммом Vibrio cholerae El Tor 18507 с помощью прямого белкового профилирования, идентификация константных и вариабельных белков, участвующих во взаимодействии фага и клетки, а также углевод-специфических рецепторов фага. Материалы и методы. Использовали коммерческий препарат холерного диагностического бактериофага эльтор, штамм V.cholerae El Tor 18507. Влияние углеводов на активность бактериофага определяли путем постановки пробы с фагом классическим и модифицированным нами методом. Белковые профили исследуемых объектов изучали с помощью метода MSP-анализа. Результаты. Показано, что сахароза ингибирует литическую активность бактериофага. Были изучены протеомные профили бактериофага эльтор и чувствительного индикаторного штамма, проведена идентификация константных и вариабельных белков исследуемых объектов посредством программы MSP Peak-List. Заключение. Анализ изменения профилей фага и микробной клетки при взаимодействии с сахарозой дал основание предположить, что сахароза в смеси культура - фаг вступает во взаимодействие именно с белковыми рецепторами фага, блокируя специфичные к холерному вибриону рецепторы, что в дальнейшем проявляется в резком снижении активности фага по отношению к чувствительному штамму.

Список литературы

1. Дерябин Д.Г. Антилизоцимная активность бактерий как фактор их фагорезистентности. Автореф. дисс. канд. мед. наук. Челябинск, 1989.

2. Кудрякова Т.А., Гаевская Н.Е., Качкина Г.В. Биологические свойства фагов патогенных вибрионов, выделенных из внешней среды. Здравоохранение РФ. 2011, 5: 41.

3. Лебедева А.Т., Артеменко К.А., Самгина Т.Ю. Основы масс-спектрометрии белков и пептидов. М., Техносфера, 2012.

4. Остроумова Н.М., Мельникова А.Ф., Царева С.П. Проблемы ООИ. 1971, 6: 4-10.

5. Телесманич Н.Р., Агафонова В.В., Чайка И.А., Сеина С.О., Чемисова О.С., Гончаренко Е.В. MALDI масс-спектрометрический анализ в типировании и внутривидовой дифференциации холерных вибрионов на основе создания референс-библиотеки протеомных профилей. Медицинский вестник Юга России. 2014, 2: 88-91.

6. Телесманич Н.Р., Ломов Ю.М. Лабораторная диагностика холеры (анализ и перспективы совершенствования). Клиническая лабораторная диагностика. 2009, 11: 51-55.

7. Телесманич Н.Р., Меньшикова Е.А., Курбатова Е.М., Гончаренко Е.В. Роль галактозоспецифического рецептора - лектина в бактерицидной активности гемолизина Vibrio cholerae не О1/О139. Журн. микробиол. 2010, 1: 10-14.

8. Телесманич Н.Р., Чайка С.О., Водяницкая С.Ю., Чемисова О.С., Чайка И.А. Применение масс-спектрометрического метода MALDI-TOF для межвидовой дифференциации близкородственных видов. Клиническая лабораторная диагностика. 2014, 8 (59): 2728.

Journal of microbiology, epidemiology and immunobiology. 2016; : 85-90

POSSIBILITIES OF APPLICATION OF MALDI-TOF MASS-SPECTROMETRY FOR STUDY OF CARBOHYDRATE-SPECIFIC RECEPTORS FOR DIAGNOSTIC BACTERIOPHAGE EL TOR

Telesmanich N. R., Goncharenko E. V., Chaika S. O., Chaika I. A., Telicheva V. O.

https://doi.org/10.36233/0372-9311-2016-2-85-90

Abstract

Aim. Study mechanisms of interaction of diagnostic bacteriophage El Tor with sensitive strain Vibrio cholerae El Tor 18507 using direct protein profiling, identification of constant and variable proteins, taking part in interaction of the phage and cell, as well as carbohydrate-specific phage receptors. Materials and methods. A commercial preparation of cholera diagnostic bacteriophage El Tor, strain V.cholerae El Tor 18507 were used. Effect of carbohydrates on bacteriophage activity was determined in experiments with phage by a classic and modified by us method. Protein profiles of the studied objects were studied using MSP-analysis method. Results. Sucrose was shown to inhibit lytic activity of bacteriophage. Proteome profiles of El Tor bacteriophage and sensitive indicator strains were studied, identification of constant and variable proteins of the studied objects by MSP Peak-list program was carried out. Conclusion. Analysis of changes of profiles of phage and microbial cell during interaction with sucrose gave a basis for assuming, that sucrose in the mixture of culture-phage enters interaction namely with phage protein receptors, blocking receptors specific for cholera vibrio, that subsequently manifests in a sharp decrease of phage activity against the sensitive strain.

References

1. Deryabin D.G. Antilizotsimnaya aktivnost' bakterii kak faktor ikh fagorezistentnosti. Avtoref. diss. kand. med. nauk. Chelyabinsk, 1989.

2. Kudryakova T.A., Gaevskaya N.E., Kachkina G.V. Biologicheskie svoistva fagov patogennykh vibrionov, vydelennykh iz vneshnei sredy. Zdravookhranenie RF. 2011, 5: 41.

3. Lebedeva A.T., Artemenko K.A., Samgina T.Yu. Osnovy mass-spektrometrii belkov i peptidov. M., Tekhnosfera, 2012.

4. Ostroumova N.M., Mel'nikova A.F., Tsareva S.P. Problemy OOI. 1971, 6: 4-10.

5. Telesmanich N.R., Agafonova V.V., Chaika I.A., Seina S.O., Chemisova O.S., Goncharenko E.V. MALDI mass-spektrometricheskii analiz v tipirovanii i vnutrividovoi differentsiatsii kholernykh vibrionov na osnove sozdaniya referens-biblioteki proteomnykh profilei. Meditsinskii vestnik Yuga Rossii. 2014, 2: 88-91.

6. Telesmanich N.R., Lomov Yu.M. Laboratornaya diagnostika kholery (analiz i perspektivy sovershenstvovaniya). Klinicheskaya laboratornaya diagnostika. 2009, 11: 51-55.

7. Telesmanich N.R., Men'shikova E.A., Kurbatova E.M., Goncharenko E.V. Rol' galaktozospetsificheskogo retseptora - lektina v bakteritsidnoi aktivnosti gemolizina Vibrio cholerae ne O1/O139. Zhurn. mikrobiol. 2010, 1: 10-14.

8. Telesmanich N.R., Chaika S.O., Vodyanitskaya S.Yu., Chemisova O.S., Chaika I.A. Primenenie mass-spektrometricheskogo metoda MALDI-TOF dlya mezhvidovoi differentsiatsii blizkorodstvennykh vidov. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika. 2014, 8 (59): 2728.

ВОЗМОЖНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ MALDI-TOF МАСС-СПЕКРОМЕТРИИ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ УГЛЕВОД-СПЕЦИФИЧЕСКИХ РЕЦЕПТОРОВ ДИАГНОСТИЧЕСКОГО БАКТЕРИОФАГА ЭЛЬТОР

Аннотация

POSSIBILITIES OF APPLICATION OF MALDI-TOF MASS-SPECTROMETRY FOR STUDY OF CARBOHYDRATE-SPECIFIC RECEPTORS FOR DIAGNOSTIC BACTERIOPHAGE EL TOR

Abstract

События