Журналов:     Статей:        

Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2018; : 3-9

ИММУНОФЕНОТИПИРОВАНИЕ КЛЕТОК КРОВИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ, ИММУНИЗИРОВАННЫХ КЛЕТОЧНЫМИ СТЕНКАМИ FRANCISELLA TULARENSIS РАЗНЫХ ПОДВИДОВ

Балахонов С. В., Войткова В. В., Дубровина В. И., Корытов К. М., Корнева А. В., Шкаруба Т. Т.

https://doi.org/10.36233/0372-9311-2018-5-3-9

Аннотация

Цель. Изучить субпопуляционный состав клеток крови экспериментальных животных, привитых клеточным стенкам (КС) Francisella tularensis разных подвидов. Материалы и методы. 210 сертифицированных (НПО «Вектор», Новосибирск) беспородных мышей иммунизировали препаратами КС F. tularensis разных подвидов в дозе 95 мкг по белку. Животных выводили из эксперимента на 3, 7, 10, 14 и 21 сутки наблюдения и определяли фенотип (CD45, CD3, CD4, CD8, CD19, CD69) клеток крови. Результаты. Динамика клеточного баланса лейкоцитов крови у экспериментальных животных зависела от подвидовой принадлежности штамма туляремийного микроба, из которого был выделен препарат. Все исследуемые препараты способствуют развитию клеточного и гуморального иммунитета, что проявляется в увеличении содержания моноцитов и В-лимфоцитов, а также экспрессии маркера активации CD69. КС F. tularensis subsp. mediasiatica А-61 способствуют активации клеточного звена иммунитета экспериментальных животных в большей степени, чем другие препараты. Возможно, что именно этот фактор обусловливает его высокую иммуногенную активность (выживаемость 83%). Заключение. На основании полученных данных существует необходимость дальнейшего детального исследования иммуногенных свойств КС F. tularensis subsp. mediasiatica А-61 в качестве перспективного компонента при конструировании вакцины против туляремии.
Список литературы

1. Балахонов С.В., Дубровина В.И., Татарников С.А., Войткова В.В., Марков Е.Ю., Мазепа А.В. Клеточные и гуморальные факторы иммунитета в патогенезе туляремии: монография. Иркутск: ИНЦХТ, 2017.

2. Войткова В.В., Дубровина В.И., Колесникова О.Б., Коновалова Ж.А., Лукьянова С.В., Бельков А.И. Методические рекомендации по выявлению фосфатидилсерина на лимфоцитах крои мышей с помощью проточного цитофлуориметра BD FACSCantoTM II. Иркутск, 2010.

3. Корнева А.В., Николаев В.Б., Козлов С.Н., Марков Е.Ю., Мазепа А.В., Попова Ю.О. Выявление мембрансвязанных протеаз Francisella tularensis. Acta Biomedica Scientifica. 2016, 1 (5): 155-159.

4. Корнева А.В., Николаев В.Б., Ястремская К.Ю., Марков Е.Ю., Войткова В.В., Соловьев С.Ю., Попова Ю.О., Мазепа А.В., Половинкина В.С. Результаты изучения иммуногенной активности клеточных оболочек Francisella tularensis разных подвидов (сообщение 1). Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2014, 4: 73-77.

5. Корнева А.В., Николаев В.Б., Ястремская К.Ю., Марков Е.Ю., Войткова В.В., Соловьев С.Ю., Попова Ю.О., Мазепа А.В., Половинкина В.С. Результаты изучения иммуногенной активности клеточных оболочек Francisella tularensis разных подвидов (сообщение 2). Acta Biomedica Scientifica. 2015, 1: 63-66.

6. Линева А.П. Физиологические показатели нормы животных. Справочник. М., «Аквариум» ФГУИППВ, 2003.

7. Чирулов Л.П., Васильев А.Г. Патофизиология иммунной системы: Учебное пособие. СПб, Фолиант, 2014.

8. Balakhonov S.V., Dubrovina V.I., Voitkova V.V., Korytov K.M., Starovoitova T.P., Ivanova T.A., Korneva A.V., Nikolaev V.B., Shkaruba T.T. Cell envelopes of Francisella tularensis: immunogenic activity and toxicity. J. Cell. Biol. Cell. Metab. 2017, 4 (014): 1-3.

9. Gunn J. S., Ernst R. K. The Structure and Function of Francisella LPS. Annals New York Academy Sciences. 2007, 1105: 202-218.

10. Hepburn M.J., Friedlander A. M., Dembek Z.F. (ed.). Chapter 8: Tularemia. In: Textbooks of military medicine: medical aspects of biological warfare. Washington: Borden Institute. 2007: 167-184.

11. Huntley J.F., Conley P.G., Rasko D.A. et al. Native outer membrane proteins protect mice against pulmonary challenge with virulent type a Francisella tularensis. Infect. Immun. 2008, 8: 3664-3671.

12. Phillips N.J., Schilling B., McLendon M.K. et al. Novel modification of lipid A of Francisella tularensis. Infect. Immun. 2004, 72 (9): 5340-5348.

13. Vinogradov E., Perry M. B. Characterization of the core part of the lipopolysaccharide O-antigen of Francisella novicida (U112). Carbohydr. Res. 2004, 339 (9): 1643-1648.

14. Wang X., Ribeiro A.A., Guan Z. et al. Structure and biosynthesis of free lipid A molecules that replace lipopolysaccharide in Francisella tularensis subsp. novicida. Biochemistry. 2006, 45 (48): 14427-14440.

15. Zhao J., Raetz C.R. A two-component Kdo hydrolase in the inner membrane of Francisella novicida. Mol. Microbiol. 2010, 78 (4): 820-836.

Journal of microbiology, epidemiology and immunobiology. 2018; : 3-9

IMMUNOPHENOTYPING OF BLOOD CELLS OF EXPERIMENTAL ANIMALS IMMUNIZED WITH CELLULAR WALLS OF FRANCISELLA TULARENSIS DIFFERENT SUBSPECIES

Balakhonov S. V., Voitkova V. V., Dubrovina V. I., Korytov K. M., Korneva A. V., Shkaruba T. T.

https://doi.org/10.36233/0372-9311-2018-5-3-9

Abstract

Aim. To study the subpopulational structure of blood cells of the experimental animals immunized with cellular walls (CW) of Francisella tularensis different subspecies. Materials and methods. Total 210 certified («Vector», Novosibirsk) outbred mice were immunized with CW preparations of F. tularensis different subspecies in 95 pg protein dose. After 3, 7, 10, 14 and 21 days of observation the phenotypes (CD45, CD3, CD4, CD8, CD19, CD69) of blood cells were detected. Results. Dynamics of leukocyte balance in experimental animals depended on F. tularensis subspecies. All studied preparations promoted development of cellular and humoral immunity that confirmed by the increase of monocytes and B-lymphocyte, and also by the expression of CD69 activation marker. CW of F. tularensis subsp. mediasiatica А-61 promoted higher activation of cellular immunity in experimental animals in comparison with other preparations. Probably, exactly this factor causes its high immunogenic activity (83 % survival rate). Conclusion. On the basis of the results there is a necessity to further detailed research of CW immunogenic properties of F. tularensis subsp. mediasiatica А-61 as a perspective component in design of a tularemia vaccine.
References

1. Balakhonov S.V., Dubrovina V.I., Tatarnikov S.A., Voitkova V.V., Markov E.Yu., Mazepa A.V. Kletochnye i gumoral'nye faktory immuniteta v patogeneze tulyaremii: monografiya. Irkutsk: INTsKhT, 2017.

2. Voitkova V.V., Dubrovina V.I., Kolesnikova O.B., Konovalova Zh.A., Luk'yanova S.V., Bel'kov A.I. Metodicheskie rekomendatsii po vyyavleniyu fosfatidilserina na limfotsitakh kroi myshei s pomoshch'yu protochnogo tsitofluorimetra BD FACSCantoTM II. Irkutsk, 2010.

3. Korneva A.V., Nikolaev V.B., Kozlov S.N., Markov E.Yu., Mazepa A.V., Popova Yu.O. Vyyavlenie membransvyazannykh proteaz Francisella tularensis. Acta Biomedica Scientifica. 2016, 1 (5): 155-159.

4. Korneva A.V., Nikolaev V.B., Yastremskaya K.Yu., Markov E.Yu., Voitkova V.V., Solov'ev S.Yu., Popova Yu.O., Mazepa A.V., Polovinkina V.S. Rezul'taty izucheniya immunogennoi aktivnosti kletochnykh obolochek Francisella tularensis raznykh podvidov (soobshchenie 1). Epidemiologiya i vaktsinoprofilaktika. 2014, 4: 73-77.

5. Korneva A.V., Nikolaev V.B., Yastremskaya K.Yu., Markov E.Yu., Voitkova V.V., Solov'ev S.Yu., Popova Yu.O., Mazepa A.V., Polovinkina V.S. Rezul'taty izucheniya immunogennoi aktivnosti kletochnykh obolochek Francisella tularensis raznykh podvidov (soobshchenie 2). Acta Biomedica Scientifica. 2015, 1: 63-66.

6. Lineva A.P. Fiziologicheskie pokazateli normy zhivotnykh. Spravochnik. M., «Akvarium» FGUIPPV, 2003.

7. Chirulov L.P., Vasil'ev A.G. Patofiziologiya immunnoi sistemy: Uchebnoe posobie. SPb, Foliant, 2014.

8. Balakhonov S.V., Dubrovina V.I., Voitkova V.V., Korytov K.M., Starovoitova T.P., Ivanova T.A., Korneva A.V., Nikolaev V.B., Shkaruba T.T. Cell envelopes of Francisella tularensis: immunogenic activity and toxicity. J. Cell. Biol. Cell. Metab. 2017, 4 (014): 1-3.

9. Gunn J. S., Ernst R. K. The Structure and Function of Francisella LPS. Annals New York Academy Sciences. 2007, 1105: 202-218.

10. Hepburn M.J., Friedlander A. M., Dembek Z.F. (ed.). Chapter 8: Tularemia. In: Textbooks of military medicine: medical aspects of biological warfare. Washington: Borden Institute. 2007: 167-184.

11. Huntley J.F., Conley P.G., Rasko D.A. et al. Native outer membrane proteins protect mice against pulmonary challenge with virulent type a Francisella tularensis. Infect. Immun. 2008, 8: 3664-3671.

12. Phillips N.J., Schilling B., McLendon M.K. et al. Novel modification of lipid A of Francisella tularensis. Infect. Immun. 2004, 72 (9): 5340-5348.

13. Vinogradov E., Perry M. B. Characterization of the core part of the lipopolysaccharide O-antigen of Francisella novicida (U112). Carbohydr. Res. 2004, 339 (9): 1643-1648.

14. Wang X., Ribeiro A.A., Guan Z. et al. Structure and biosynthesis of free lipid A molecules that replace lipopolysaccharide in Francisella tularensis subsp. novicida. Biochemistry. 2006, 45 (48): 14427-14440.

15. Zhao J., Raetz C.R. A two-component Kdo hydrolase in the inner membrane of Francisella novicida. Mol. Microbiol. 2010, 78 (4): 820-836.