АЛГОРИТМ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ CLOSTRIDIUM DIFFICILE-АССОЦИИРОВАННОЙ ДИАРЕИ

Главная

Статья в Elpub

РУС ENG

Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2018; : 45-53

АЛГОРИТМ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ CLOSTRIDIUM DIFFICILE-АССОЦИИРОВАННОЙ ДИАРЕИ

Сухина М. А., Образцов И. В., Михалевская В. И., Ачкасов С. И., Сафин А. Л., Шелыгин Ю. А.

https://doi.org/10.36233/0372-9311-2018-2-45-53

Аннотация

Цель. Разработка оптимального алгоритма лабораторной диагностики Clostridium difficile-ассоциированной диареи для достижения максимально достоверных результатов. Материалы и методы. В исследование были включены 211 пациентов с клинической картиной C.difficile-ассоциированной диареи. Материалом для исследования служили просветные фекалии. Все образцы исследовались одновременно иммунологическими (определение глутаматдегидрогеназы - ГДГ, токсинов А и В C. difficile иммуноферментным и иммунохроматографическим анализом), бактериологическим и молекулярнобиологическими (полимеразная цепная реакция с использованием системы «GENEexpert rtPCR system», Cepheid, США) методами. Результаты. Из 211 образцов просветных фекалий были изолированы 126 штаммов C. difficile. В образцах просветных фекалий, из которых был выделен возбудитель, ГДГ определялась в 54% (68) случаев методом иммунохроматографического анализа (ИХА), и в 11,1% (14) случаев методом иммуноферментного анализа (ИФА). При возрастании степени обсемененности фекалий C. difficile увеличивалась чувствительность иммунологических тестов выявления ГДГ (p<0,05). Начиная со степени обсемененности 10⁷ КОЕ/г наблюдается резкое увеличение чувствительности обнаружения ГДГ иммуноферментным методом. Использование для диагностики C. difficile-ассоциированной инфекции только иммунологических тестов определения токсинов А и В приведет к ложноотрицательным результатам в 19,8% и 55,6% случаев при присутствии токсина А и в 35,7% и 44,4% случаев при наличии токсина В. Заключение. Трехступенчатый алгоритм лабораторной диагностики антибиотикоассоциированной диареи характеризуется высокой воспроизводимостью результатов исследований, чувствительностью и специфичностью. Основан на поэтапном выполнении тестов для детекции токсигенной C. difficile. Использование такого алгоритма диагностики обеспечит своевременную постановку диагноза, локальный микробиологический мониторинг и эпидемиологический надзор за C.difficile-ассоциированной инфекцией.

Список литературы

1. ГОСТ Р 53022.2-2008. Технологии лабораторные клинические. Требования к качеству клинических лабораторных исследований. Часть 2. Оценка аналитической надежности методов исследования (точность, чувствительность, специфичность). Clinical laboratory technolog, 2008.

2. Сафин А.Л., Ачкасов С.И., Сухина М.А. Сушков О.И. Факторы риска развития диареи, ассоциированной с Qostridium difficile, у колопроктологических больных. Коло-проктология. 2017, 1 (59): 59-67.

3. Arimoto J., Horita N., Kato S. et al. Diagnostic test accuracy of glutamate dehydrogenase for Clostridium difficile: Systematic review and meta-analysis. Sci. Rep. 2016, 6: 29754. doi: 10.1038/srep29754.

4. Burnham C.A., Carroll K.C. Diagnosis of Clostridium difficile infection: an ongoing conundrum for clinicians and for clinical laboratories. Clinical Microbiology Reviews, 2013, 26: 604630.

5. Kazanowski M., Smolarek S., Kinnarney F. et al. Clostridium difficile: Epidemiology, diagnostic and therapeutic possibilities - A systematic review. Techniques in coloproctology. 2014, 18: 223-232.

6. Martin J., Monaghan T., Wilcox M.H. Clostridium difficile infection: advances in epidemiology, diagnosis and understanding of transmission. Nature Reviews Gastroenterology and Hepatology. 2016, 13: 206-216.

7. Moon H-W., Kim H.N., Hur M. et al. Comparison of diagnostic algorithms for detecting toxigenic Clostridium difficile in routine practice at a tertiary referral hospital in Korea. PLoS One. 2016; 11 (8): e0161139; doi:10.1371/journal.pone.0161139.

8. Putsathit P., Morgan J., Bradford D. et al. Evaluation of the BD Max Cdiff assay for the detection of toxigenic Clostridium difficile in human stool specimens. Pathology. 2015, 47 (2): 165168.

9. Skricka T., Hemmelova B., Mitas L. et al. Клостридиальный колит - важная проблема в хирургии. Колопроктология. 2014, 4 (53): 17-23.

Journal of microbiology, epidemiology and immunobiology. 2018; : 45-53

ALGORITHM FOR LABORATORY DIAGNOSTICS OF CLOSTRIDIUM DIFFICILE ASSOCIATED DIARRHEA

Sukhina M. A., Obraztsov I. V., Mikhalevskaya V. I., Achkasov S. I., Safin A. L., Shelygin Yu. A.

https://doi.org/10.36233/0372-9311-2018-2-45-53

Abstract

Aim. To develop an optimal algorithm for laboratory diagnosis of C. difficile associated diarrhea in context of obtaining the most reliable analysis results. Materials and methods. 211 patients with clinically significant C. difficile associated diarrhea participated in the study. Luminal faeces were analysed by immunological (immune chromatographic assay, ICA; ELISA) bacteriological and molecular (GENEexpert rtPCR system, Cepheid, USA) methods. Results. We isolated 126 C. difficile strains from 211 samples of luminal faeces. We identified glutamate dehydrogenase (GDH) in 54% of cases (n=68) by means of immune ICA, and in 11.1% of cases (n=14) by means of ELISA. The increase of bacterial concentration is associated with the growth of sensitivity of GDH detection by immunological tests (p<0.05). We defined a dramatic increase of GDH detection sensitivity starting from 10⁷ CFU/g concentration. Toxins A and B evaluation by immunological tests only leads to false-negative results in 19,8% (ICA) and 55,6% (ELISA) of toxin A positive cases and in 35,7% (ICA) и 44,4% (ELISA) of toxin B positive cases. Conclusion. Three-step diagnostic algorithm for antibiotic-associated diarrhea is characterized by high replicability, sensitivity and specificity. It is based on step-by-step performance of the tests for detection of toxinproducing C. difficile. Application of such approach ensures timely diagnosis, local microbiological monitoring and epidemiological control of C. difficile associated infection.

References

1. GOST R 53022.2-2008. Tekhnologii laboratornye klinicheskie. Trebovaniya k kachestvu klinicheskikh laboratornykh issledovanii. Chast' 2. Otsenka analiticheskoi nadezhnosti metodov issledovaniya (tochnost', chuvstvitel'nost', spetsifichnost'). Clinical laboratory technolog, 2008.

2. Safin A.L., Achkasov S.I., Sukhina M.A. Sushkov O.I. Faktory riska razvitiya diarei, assotsiirovannoi s Qostridium difficile, u koloproktologicheskikh bol'nykh. Kolo-proktologiya. 2017, 1 (59): 59-67.

4. Burnham C.A., Carroll K.C. Diagnosis of Clostridium difficile infection: an ongoing conundrum for clinicians and for clinical laboratories. Clinical Microbiology Reviews, 2013, 26: 604630.

8. Putsathit P., Morgan J., Bradford D. et al. Evaluation of the BD Max Cdiff assay for the detection of toxigenic Clostridium difficile in human stool specimens. Pathology. 2015, 47 (2): 165168.

9. Skricka T., Hemmelova B., Mitas L. et al. Klostridial'nyi kolit - vazhnaya problema v khirurgii. Koloproktologiya. 2014, 4 (53): 17-23.

АЛГОРИТМ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ CLOSTRIDIUM DIFFICILE-АССОЦИИРОВАННОЙ ДИАРЕИ

Аннотация

ALGORITHM FOR LABORATORY DIAGNOSTICS OF CLOSTRIDIUM DIFFICILE ASSOCIATED DIARRHEA

Abstract

События