ВЛИЯНИЕ МЕТОДОВ ИММОБИЛИЗАЦИИ ЭРИТРОПОЭТИНА НА ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ ВЫЯВЛЕНИЯ СПЕЦИФИЧЕСКИХ IgG К EПB В СЫВОРОТКАХ КРОВИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЙ ЖИВОТНЫХ

Главная

Статья в Elpub

РУС ENG

Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2017; : 49-55

ВЛИЯНИЕ МЕТОДОВ ИММОБИЛИЗАЦИИ ЭРИТРОПОЭТИНА НА ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ ВЫЯВЛЕНИЯ СПЕЦИФИЧЕСКИХ IgG К EПB В СЫВОРОТКАХ КРОВИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЙ ЖИВОТНЫХ

Кудряшова А. М., Борисова О. В., Михайлова Н. А., Лоншаков Д. В., Катлинский А. В.

https://doi.org/10.36233/0372-9311-2017-6-49-55

Аннотация

Цель. Исследование влияния методов иммобилизации эритропоэтина на чувствительность выявления специфических IgG к человеческому эритропоэтину (чЭПО) в сыворотках крови экспериментальный животных. Материалы и методы. В работе использовали сыворотки крови кроликов и морских свинок, полученных после введения препаратов эритропоэтина. Схемы иммуноферментного метода включали варианты пассивной иммобилизации человеческого рекомбинантного эритропоэтина (чрЭПО) на планшете и два варианта иммунохимической иммобилизации: связывание биотинилированного чрЭПО в лунках планшета с пассивно иммобилизованным стрептавидином и связывание чрЭПО с пассивно иммобилизованными на планшетах антителами к эритропоэтину. Результаты. Показано, что иммунохимическая иммобилизация приводит к повышению чувствительности в диапазоне от 2 до 10 раз при выявлении антител к чЭПО по сравнению с пассивной иммобилизацией. Заключение. Полученные результаты свидетельствуют о значительном влиянии метода иммобилизации чрЭПО на чувствительность выявления антител к чЭПО. При выявлении антител к нативным конформационным эпитопам иммунохимическая иммобилизация является предпочтительной.

Список литературы

1. Barger Т.Е., KuckA.J., Chirmule N. etal. Detection ofanti-ESA antibodies in human samples from PRCA and non-PRCA patients: an immunoassay platform comparison. Nephrol Dial. Transplant. 2012, 27: 688-693.

2. Barger T.E., Wrona D., Goletz T.J. et al. A detailed examination of the antibody prevalence and characteristics of anti-ESA antibodies.Nephrol. Dial Transplant. 2012, 27 (10): 3892- 3899.

3. Butler J.E. Solid supports in enzyme-linked immunosorbent assays and other solid phase immunoassays. Methods Mol. Med. 2004, 94: 333-372.

4. Casadevall N., Nataf J., Viron B. et al. Pure red-cell aplasia and antierythropoietin antibodies in patients treated with recombinant erythropoietin. New Engl. J. Med. 2002, 346: 469-475.

5. Gross J., Moller R., Henke W. et al. Detection of anti-EPO antibodies in human sera by a bridging ELISA is much more sensitive when coating biotinylated rhEPO to streptavidin rather than using direct coating of rhEPO. J. Immunol. Methods. 2006, 313 (1-2): 176-182.

6. Herrington W., Wieser C., Rosenkranz A.R. Pure red cell aplasia after treatment of renal anaemia with epoetin theta. Clin. Kidney J. 2013, 6 (5): 539-542.

7. Lonshakov D. V., Sheremet'ev S. V., Belosludtseva E. M. et al. Synthesis of 4-aminobenzoic acid esters of polyethylene glycol and their use for pegylation of therapeutic proteins. RSC Adv. 2015, 5 (53): 42903-42909.

8. Macdougall I.C., Casadevall N., Locatelli F. et al. Incidence of erythropoietin antibody-me-diated pure red cell aplasia: the prospective immunogenicity surveillance registry (PRIMS). Nephrol Dial Transplant. 2015, 30 (3): 451-460.

9. Macdougall I.C., Roger S.D., de Francisco A. et al. Antibody-mediated pure red cell aplasia in chronic kidney disease patients receiving erythropoiesis stimulating agents: new insights. Kidney Int. 2012, 81:727-732.

10. Rabe М., Verdes D., Seeger S. Understanding protein adsorption phenomena at solid surfaces. Advances Colloid Interface Sci. 2011, 162 (1-2): 87-106.

11. Shin S.K., Ha S.K., Lee K.W. et al. Application of a bridging ELISA for detection of antierythropoietin binding antibodies and a cell-based bioassay for neutralizing antibodies in human sera. J. Pharm. Biomed Anal. 2010, 52: 289-293.

12. Van Der Zee J.S., Van Swieten P., Aalberse R.C. Serologic aspects of IgG4 antibodies. II. IgG4 antibodies form small, nonprecipitating immune complexes due to functional monovalency. J. Immunol. 1986, 137: 3566-3571.

13. Weeraratne D.K., Kuck A.J., Chirmule N. et al. Measurement of anti-erythropoiesis stimulating agent IgG4 antibody as an indicator of antibody-mediated pure red cell Aplasia. Clin. Vac. Immunol.2013, 20 (1): 46-51.

Journal of microbiology, epidemiology and immunobiology. 2017; : 49-55

EFFECT OF METHODS OF IMMOBILIZATION OF ERYTHROPOIETIN ON THE SENSITIVITY FOR THE DETECTION OF SPECIFIC IgG TO EPO IN EXPERIMENTAL ANIMALS SERA

Kudryashova A. M., Borisova O. V., Mikhailova N. A., Lonshakov D. V., Katlinsky A. V.

https://doi.org/10.36233/0372-9311-2017-6-49-55

Abstract

Aim. The study of the effect of the erythropoietin coating procedure on sensitivity using the same secondary detection methods to quantify anti-EPO IgG positive animal sera. Materials and methods. Sera from experimental animals - rabbits and guinea pigs - after rhEPO injection were used. The methods includes directly coated ELISA and two types of immunochemical immobilization: capturing biotinylated rhEPO on streptavidin coated microtiier plates and capturing rhEPO via a specific antibody Results. Immunochemical rhEPO immobilization results in a sensitivity from 2 to 10 of magnitude higher than direct coating of rhEPO. Conclusion. Our findings show that the method of rhEPO immobilization to microtiter plates is a critical determinant for the sensitivity of ELISA used for measuring anti-EPO antibodies. Assays in which rhEPO was captured via a specific mAb, or in which biotinylated rhEPO was captured via streptavidin, are preferred to detect serum antibodies to native structural state.

References

1. Barger T.E., KuckA.J., Chirmule N. etal. Detection ofanti-ESA antibodies in human samples from PRCA and non-PRCA patients: an immunoassay platform comparison. Nephrol Dial. Transplant. 2012, 27: 688-693.

2. Barger T.E., Wrona D., Goletz T.J. et al. A detailed examination of the antibody prevalence and characteristics of anti-ESA antibodies.Nephrol. Dial Transplant. 2012, 27 (10): 3892- 3899.

3. Butler J.E. Solid supports in enzyme-linked immunosorbent assays and other solid phase immunoassays. Methods Mol. Med. 2004, 94: 333-372.

4. Casadevall N., Nataf J., Viron B. et al. Pure red-cell aplasia and antierythropoietin antibodies in patients treated with recombinant erythropoietin. New Engl. J. Med. 2002, 346: 469-475.

6. Herrington W., Wieser C., Rosenkranz A.R. Pure red cell aplasia after treatment of renal anaemia with epoetin theta. Clin. Kidney J. 2013, 6 (5): 539-542.

10. Rabe M., Verdes D., Seeger S. Understanding protein adsorption phenomena at solid surfaces. Advances Colloid Interface Sci. 2011, 162 (1-2): 87-106.

ВЛИЯНИЕ МЕТОДОВ ИММОБИЛИЗАЦИИ ЭРИТРОПОЭТИНА НА ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ ВЫЯВЛЕНИЯ СПЕЦИФИЧЕСКИХ IgG К EПB В СЫВОРОТКАХ КРОВИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЙ ЖИВОТНЫХ

Аннотация

EFFECT OF METHODS OF IMMOBILIZATION OF ERYTHROPOIETIN ON THE SENSITIVITY FOR THE DETECTION OF SPECIFIC IgG TO EPO IN EXPERIMENTAL ANIMALS SERA

Abstract

События