Андрология и генитальная хирургия. 2022; 23: 19-26
Преимущества сперматологического исследования методом количественного кариологического анализа незрелых половых клеток у пациентов с азооспермией и криптозооспермией
https://doi.org/10.17650/2070-9781-2022-23-2-19-26Аннотация
Введение. Обнаружение сперматозоидов у пациентов с предполагаемой азооспермией является актуальной задачей при диагностике причин мужского бесплодия и решении проблемы репродукции. Количественный кариологический анализ состава незрелых половых клеток (ККА НПК) по стадиям их развития позволяет неинвазивно оценить состояние сперматогенеза и прохождение различных стадий мейоза, и, таким образом, имеет определенные преимущества по сравнению со стандартным спермиологическим исследованием (ССИ) и тестикулярной биопсией.
Цель исследования – сравнительный анализ возможностей ССИ и ККА НПК по обнаружению половых клеток в эякуляте пациентов с предполагаемой азооспермией.
Материалы и методы. Исследованы образцы эякулята 20 мужчин с первичным бесплодием различного генеза (генетически обусловленные формы мужского бесплодия и неясной этиологии) и подозрением на азооспермию. Образцы анализировали параллельно 2 методами – используя ССИ, выполненное согласно рекомендациям руководства Всемирной организации здравоохранения (2010), и ККА НПК.
Результаты. По данным ССИ, криптозооспермия обнаружена в 1 (5 %) из 20 образцов эякулята. ККА НПК позволил выявить наличие сперматозоидов в 10 (50 %) образцах, в том числе у 53 % пациентов с азооспермией (по данным ССИ). Среднее количество сперматозоидов, обнаруженных в осадке эякулята при ККА НПК, составило 2,25 ± 4,22, что статистически значимо больше (р = 0,019; U = 113) числа сперматозоидов, выявленных с помощью ССИ (0,25 ± 1,12).
Заключение. У пациентов с подозрением на азооспермию эффективность выявления криптозооспермии с помощью метода ККА НПК значительно (в 10 раз) превышает результативность ССИ. Данный метод дополняет ССИ и позволяет неинвазивно выявить нарушение мейоза, в том числе при крайне малой концентрации сперматозоидов. Анализ безопасен для пациента и может быть выполнен многократно для отслеживания динамики сперматологических показателей.
Список литературы
1. Skakkebaek N.E., Rajpert-De Meyts E., Buck Louis G.M. et al. Male reproductive disorders and fertility trends: influences of environment and genetic susceptibility. Physiol Rev 2016;96(1):55–97. DOI: 10.1152/physrev.00017.2015. PMID: 26582516.
2. Руководство ВОЗ по исследованию и обработке эякулята человека. Пер. с англ. Н.П. Макарова. Науч. ред. Л.Ф. Курило. 5-е изд. М.: Капитал Принт, 2012. 291 с.
3. Taussig L.M., Lobeck C.C., di Sant’Agnese P.A. et al. Fertility in males with cystic fibrosis. N Engl J Med 1972;287(12):586–9. DOI: 10.1056/NEJM197209212871204.
4. Штаут М.И., Шилейко Л.В., Репина С.А. и др. Комплексное сперматологическое обследование пациентов с муковисцидозом. Андрология и генитальная хирургия 2017;18(4):69–76. DOI: 10.17650/2070-9781-2017.
5. Штаут М.И., Сорокина Т.М., Курило Л.Ф. и др. Сравнительный анализ результатов спермиологического исследования у пациентов с азооспермией, вызванной муковисцидозом и синдромом врожденной двусторонней аплазии семявыносящих протоков. Андрология и генитальная хирургия 2019;20(1):82–90. DOI: 10.17650/2070-9781-2019-20-1-82-90.
6. Черных В.Б., Степанова А.А., Бескоровайная Т.С. и др. Частота и спектр мутаций и IVS8-T-полиморфизма гена CFTR среди российских мужчин с бесплодием. Генетика 2010;46(6):844–52
7. Андреева М.В., Хаят С.Ш., Шилейко Л.В. и др. Количественный кариологический анализ незрелых половых клеток из эякулята как часть протокола обследования мужчин с бесплодием в браке. Андрология и генитальная хирургия 2017;18(1):62–9. DOI: 10.17650/2070-97812017-18-1-62-69.
8. Курило Л.Ф., Чеботарев А.Н., Шилейко Л.В. и др. Сравнительный анализ соотношения незрелых половых клеток на разных стадиях их дифференцировки в биоптате яичка и эякуляте у пациентов с азоо- и олигозооспермией. Проблемы репродукции 1997;3(1): 80–4.
9. Курило Л.Ф. Способ цитологической диагностики нарушения сперматогенеза. Патент на изобретение № 2328736 от 01.02.2007.
10. Курило Л.Ф., Дубинская В.П., Остроумова Т.В. и др. Оценка сперматогенеза по незрелым половым клеткам эякулята. Проблемы репродукции 1995;3:33–8.
11. Сорокина Т.М., Андреева М.В., Штаут М.И. и др. Оценка состояния сперматогенеза у пациентов с азооспермией или криптозооспермией с помощью метода количественного кариологического анализа незрелых половых клеток. Андрология и генитальная хирургия 2019;20(1):75–81. DOI: 10.17650/2070-9781-2019-20-1-75-81.
12. Курило Л.Ф., Шилейко Л.В., Остроумова Т.В. и др. Возможности цитологической количественной оценки состояния сперматогенеза по незрелым половым клеткам из эякулята пациентов с проблемами деторождения. Бизнес медицина 1998;3:12–3.
13. Штаут М.И., Сорокина Т.М., Курило Л.Ф., Черных В.Б. Сперматологическая характеристика мозаичной и немозаичной формы синдрома Клайнфельтера. Андрология и генитальная хирургия 2019;20(4):12–6. DOI: 10.17650/2070-9781-2019-20-4-12-16.
14. Черных В.Б., Курило Л.Ф., Шилейко Л.В. и др. Анализ микроделеций в локусе AZF у мужчин с бесплодием: совместный опыт исследований. Медицинская генетика 2003;2(8): 367–79. [Chernykh V.B., Kurilo L.F., Shileiko L.V. et al. Analysis of microdeletions in the AZF locus in men with infertility: collaborative experience of research. Meditsinskaya genetika = Medical genetics 2003;2(8):367–79. (In Russ.)].
15. Сафина Н.Ю., Яманди Т.А., Черных В.Б. и др. Генетические факторы мужского бесплодия, их сочетания и спермиологическая характеристика мужчин с нарушением фертильности. Андрология и генитальная хирургия 2018;19(2):40–51. DOI: 10.17650/2070-9781-2018-19-240-51.
16. Райцина С.С. Сперматогенез и структурные основы его регуляции. М.: Наука, 1985. 207 с.
17. Ухов Ю.И., Астраханцев А.Ф. Морфометрические методы в оценке функционального состояния семенников. Архив анатомии, гистологии и эмбриологии 1983;(3):66–72.
18. Астраханцев А.Ф. Структура мужских половых желез в постнатальном онтогенезе. Автореф. дис. … докт. мед. наук. Рязань, 1996. 48 c.
Andrology and Genital Surgery. 2022; 23: 19-26
Advantages of semen analysis by quantitative kariological analysis of immature germ cells in azoospermic and cryptozoospermic patients
https://doi.org/10.17650/2070-9781-2022-23-2-19-26Abstract
Introduction. Obtaining spermatozoa in azoospermic men is a relevant objective. Quantitative karyological analysis of immature germ cells (QKA IGCs) allows to characterize the progression of spermatogenesis through different meiotic stages, that present some advantages in comparison with standard semen analysis (SSA) examination and testicular biopsy.
The study objective was to analyze SSA and QKA IGCs for detecting of germ cells in the ejaculate of patients with suspected azoospermia.
Materials and methods. The ejaculate samples of 20 men with suspected azoospermia of various etiology (genetically determined and idiopathic male infertility) were studied. The ejaculate samples were processed in parallel by two methods, SSA performed according to the WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen (2010) and QKA IGCs.
Results. Using by the SSA, cryptozoospermia was detected in 1 (5 %) of 20 ejaculate samples. QKA IGCs revealed cryptozoospermia in 10 (50 %) samples, including 53 % of patients (with azoospermia according to SSA). The number of spermatozoa in the ejaculate sediment as a result of QKA IGСs (2.25 ± 4.22) is higher (p = 0.019; U = 113) than the number of spermatozoa as a result of the SSA – 0.25 ± 1.12.
Conclusion. In patients with suspected azoospermia, the effectiveness of detecting cryptozoospermia using the QKA IGCs method is significantly (10 times) higher than the SSA. This method complements SSA and makes it possible to detect non-invasively the meiosis defects, including cases with an extremely low concentration of spermatozoa. The analysis is safe for the patient and can be performed repeatedly to track the dynamics of semen parameters.
References
1. Skakkebaek N.E., Rajpert-De Meyts E., Buck Louis G.M. et al. Male reproductive disorders and fertility trends: influences of environment and genetic susceptibility. Physiol Rev 2016;96(1):55–97. DOI: 10.1152/physrev.00017.2015. PMID: 26582516.
2. Rukovodstvo VOZ po issledovaniyu i obrabotke eyakulyata cheloveka. Per. s angl. N.P. Makarova. Nauch. red. L.F. Kurilo. 5-e izd. M.: Kapital Print, 2012. 291 s.
3. Taussig L.M., Lobeck C.C., di Sant’Agnese P.A. et al. Fertility in males with cystic fibrosis. N Engl J Med 1972;287(12):586–9. DOI: 10.1056/NEJM197209212871204.
4. Shtaut M.I., Shileiko L.V., Repina S.A. i dr. Kompleksnoe spermatologicheskoe obsledovanie patsientov s mukovistsidozom. Andrologiya i genital'naya khirurgiya 2017;18(4):69–76. DOI: 10.17650/2070-9781-2017.
5. Shtaut M.I., Sorokina T.M., Kurilo L.F. i dr. Sravnitel'nyi analiz rezul'tatov spermiologicheskogo issledovaniya u patsientov s azoospermiei, vyzvannoi mukovistsidozom i sindromom vrozhdennoi dvustoronnei aplazii semyavynosyashchikh protokov. Andrologiya i genital'naya khirurgiya 2019;20(1):82–90. DOI: 10.17650/2070-9781-2019-20-1-82-90.
6. Chernykh V.B., Stepanova A.A., Beskorovainaya T.S. i dr. Chastota i spektr mutatsii i IVS8-T-polimorfizma gena CFTR sredi rossiiskikh muzhchin s besplodiem. Genetika 2010;46(6):844–52
7. Andreeva M.V., Khayat S.Sh., Shileiko L.V. i dr. Kolichestvennyi kariologicheskii analiz nezrelykh polovykh kletok iz eyakulyata kak chast' protokola obsledovaniya muzhchin s besplodiem v brake. Andrologiya i genital'naya khirurgiya 2017;18(1):62–9. DOI: 10.17650/2070-97812017-18-1-62-69.
8. Kurilo L.F., Chebotarev A.N., Shileiko L.V. i dr. Sravnitel'nyi analiz sootnosheniya nezrelykh polovykh kletok na raznykh stadiyakh ikh differentsirovki v bioptate yaichka i eyakulyate u patsientov s azoo- i oligozoospermiei. Problemy reproduktsii 1997;3(1): 80–4.
9. Kurilo L.F. Sposob tsitologicheskoi diagnostiki narusheniya spermatogeneza. Patent na izobretenie № 2328736 ot 01.02.2007.
10. Kurilo L.F., Dubinskaya V.P., Ostroumova T.V. i dr. Otsenka spermatogeneza po nezrelym polovym kletkam eyakulyata. Problemy reproduktsii 1995;3:33–8.
11. Sorokina T.M., Andreeva M.V., Shtaut M.I. i dr. Otsenka sostoyaniya spermatogeneza u patsientov s azoospermiei ili kriptozoospermiei s pomoshch'yu metoda kolichestvennogo kariologicheskogo analiza nezrelykh polovykh kletok. Andrologiya i genital'naya khirurgiya 2019;20(1):75–81. DOI: 10.17650/2070-9781-2019-20-1-75-81.
12. Kurilo L.F., Shileiko L.V., Ostroumova T.V. i dr. Vozmozhnosti tsitologicheskoi kolichestvennoi otsenki sostoyaniya spermatogeneza po nezrelym polovym kletkam iz eyakulyata patsientov s problemami detorozhdeniya. Biznes meditsina 1998;3:12–3.
13. Shtaut M.I., Sorokina T.M., Kurilo L.F., Chernykh V.B. Spermatologicheskaya kharakteristika mozaichnoi i nemozaichnoi formy sindroma Klainfel'tera. Andrologiya i genital'naya khirurgiya 2019;20(4):12–6. DOI: 10.17650/2070-9781-2019-20-4-12-16.
14. Chernykh V.B., Kurilo L.F., Shileiko L.V. i dr. Analiz mikrodeletsii v lokuse AZF u muzhchin s besplodiem: sovmestnyi opyt issledovanii. Meditsinskaya genetika 2003;2(8): 367–79. [Chernykh V.B., Kurilo L.F., Shileiko L.V. et al. Analysis of microdeletions in the AZF locus in men with infertility: collaborative experience of research. Meditsinskaya genetika = Medical genetics 2003;2(8):367–79. (In Russ.)].
15. Safina N.Yu., Yamandi T.A., Chernykh V.B. i dr. Geneticheskie faktory muzhskogo besplodiya, ikh sochetaniya i spermiologicheskaya kharakteristika muzhchin s narusheniem fertil'nosti. Andrologiya i genital'naya khirurgiya 2018;19(2):40–51. DOI: 10.17650/2070-9781-2018-19-240-51.
16. Raitsina S.S. Spermatogenez i strukturnye osnovy ego regulyatsii. M.: Nauka, 1985. 207 s.
17. Ukhov Yu.I., Astrakhantsev A.F. Morfometricheskie metody v otsenke funktsional'nogo sostoyaniya semennikov. Arkhiv anatomii, gistologii i embriologii 1983;(3):66–72.
18. Astrakhantsev A.F. Struktura muzhskikh polovykh zhelez v postnatal'nom ontogeneze. Avtoref. dis. … dokt. med. nauk. Ryazan', 1996. 48 c.
